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來了解一下細胞ROS檢測具體操作步驟!

更新時間:2022-09-08 00:00:00       點擊次數(shù):6046

  細胞ROS檢測具體是怎樣進行檢測的,小編來帶大家了解一下吧!
  活性氧檢測試劑盒是利用熒光探針DCFH-DA進行活性氧檢測的。DCFH-DA本身沒有熒光,可以自由穿過細胞膜,進入細胞內(nèi)后,可以被細胞內(nèi)的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透細胞膜,從而使探針很容易被裝載到細胞內(nèi)。細胞內(nèi)的活性氧可以氧化無熒光的DCFH生成有熒光的DCF。檢測DCF的熒光就可以知道細胞內(nèi)活性氧的水平?;钚匝鯔z測試劑盒。
  熒光法檢測線粒體產(chǎn)生和釋放的反應性氧化物(ROS)[10]。羥基自由基的檢測(二羥芐胺DHBAs和水楊酸鹽Salicylate)[11]ROSwasevaluatedbythestainingof2’,7’-dichlorofluoresceindiacetate(二氯熒光乙酰乙酸鹽).ROSproductionwasdetectedbynitrobluetetrazolium(NBT,硝基四氮唑藍)assay。
  目前,對于細胞線粒體產(chǎn)生的ROS測定,所發(fā)展的方法有(熒光標記后)激光掃描共聚焦顯微術(Takahashietal.,2002)和熒光探劑DCFDA標記后的熒光分光光度法(Esposti,2002)等,本實驗以lucigenin或luminol為探劑,用化學發(fā)光技術,對從正常大鼠肝細胞及心肌細胞分離的線粒體的METC電子漏進行了測定
  以上就是細胞ROS檢測的具體方法,大家都了解了嗎?

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