裸鼠成瘤實(shí)驗(yàn)

簡要描述：裸鼠成瘤實(shí)驗(yàn)是腫瘤研究中常用的實(shí)驗(yàn)，常用免疫缺陷型小鼠來作為移植瘤模型的載體，通過對(duì)該小鼠的注射腫瘤細(xì)胞，使其成瘤，觀察流體的生長來判斷其生物學(xué)變化。

更新時(shí)間：2024-10-26 00:00:00
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裸鼠成瘤實(shí)驗(yàn)是腫瘤研究中常用的實(shí)驗(yàn)，常用免疫缺陷型小鼠來作為移植瘤模型的載體，通過對(duì)該小鼠的注射腫瘤細(xì)胞，使其成瘤，觀察流體的生長來判斷其生物學(xué)變化。

裸鼠成瘤實(shí)驗(yàn)過程：

1、細(xì)胞的狀態(tài)是成瘤實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵，所以細(xì)胞生長狀態(tài)一定要好，取處于對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞，細(xì)胞達(dá)80-90%左右密度為宜。收集細(xì)胞前一天晚上更換新鮮培養(yǎng)基。
2、胰酶消化細(xì)胞后用預(yù)冷的PBS洗兩遍，目的為去除細(xì)胞中殘余的血清。
3、用PBS或者無血清培養(yǎng)基吹打細(xì)胞沉淀至合適的濃度，一般皮下瘤接種的細(xì)胞量為1-5x10^6個(gè)細(xì)胞/支，接種體積為0.1-0.2ml ，因此細(xì)胞懸液的濃度為1-5x 10^7個(gè)細(xì)胞/ml，如若有條件的實(shí)驗(yàn)室，也可以加基質(zhì)膠以加速瘤塊的生成，基質(zhì)膠與PBS或無血清的比列為1:1。
4、細(xì)胞消化后應(yīng)盡快接種到裸鼠皮下，一般盡量在半小時(shí)內(nèi)完成(如果接種量大，可以分批接種) ，途中將細(xì)胞懸液放在冰上降低細(xì)胞的代謝以保持細(xì)胞的活性。
5、選擇的裸鼠一般在4-6周齡，體重16-18g左右，種植部位選擇血供豐富區(qū)域，如腋窩中后部。
6、接種前用槍將細(xì)胞懸液充分的吹散，防止細(xì)胞成團(tuán)而降低細(xì)胞成活率，導(dǎo)致小鼠接種細(xì)胞數(shù)量的差異過大。
7、接種時(shí)，針頭在皮下進(jìn)針深一點(diǎn)，約1cm深，針頭在皮下左右滑動(dòng)幾次，以便細(xì)胞接種成團(tuán)，減少注射后細(xì)胞懸液從針眼溢出。
8、接種后1-2周左右可以見到皮下開始出現(xiàn)腫塊。
9、根據(jù)腫瘤細(xì)胞的特性和接種細(xì)胞的量，一般皮下成瘤的周期為1-2個(gè)月。腫瘤不宜生長過大，一般不要超過2000mm3。
10、腫瘤大小測量一般為1周兩次，游標(biāo)卡尺測量腫瘤最長和最短部位。V= 1/2*a*b2 (a為長軸，b為短軸)。

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